熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。主要用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光。
熒光顯微鏡觀察到的熒光圖像具有形態(tài)特征,具有熒光顏色和亮度。在判斷結(jié)果時(shí),要結(jié)合起來(lái)作出的判斷。結(jié)果是根據(jù)主觀指標(biāo),即工人的眼睛來(lái)記錄的。作為一般的定性觀測(cè),它基本上是的。隨著科技的發(fā)展,客觀指標(biāo)被用來(lái)記錄判斷結(jié)果,如使用細(xì)胞分光光度計(jì)、圖像分析儀等儀器。但是,這些文書所記錄的結(jié)果也要與主觀判斷相結(jié)合。
熒光顯微鏡的常見問(wèn)題回答:
1、為什么目鏡下觀察到的圖像只有一半兒?
出現(xiàn)這種情況的原因一般是CT環(huán)調(diào)整出現(xiàn)了問(wèn)題。CT環(huán)位于目鏡下方,也叫合軸調(diào)中目鏡,有CT/O/S三個(gè)參數(shù)設(shè)置。CT對(duì)應(yīng)的是光路對(duì)準(zhǔn)了望遠(yuǎn)鏡;O對(duì)應(yīng)的是光路中沒(méi)有物體;S對(duì)應(yīng)的是光路中有遮光板。那么上述情況就是CT環(huán)這個(gè)螺旋位于CT和S兩個(gè)參數(shù)之間。
2、為什么白光觀察下的物體特別暗?
環(huán)狀光闌沒(méi)有開至大光圈。環(huán)狀光闌位于光源和聚光器之間,使光線透過(guò)聚光器聚焦到標(biāo)本上;或者是光強(qiáng)調(diào)節(jié)旋鈕處于關(guān)閉狀態(tài)。
3、正確觀察熒光的步驟?
關(guān)閉室內(nèi)的燈光,打開白光電源和汞燈電源,一般汞燈需要提前打開10分鐘預(yù)熱才能達(dá)到亮;關(guān)閉熒光shutter,用低倍鏡找到細(xì)胞位置;關(guān)閉透射光按鈕,打開熒光光路shutter,旋轉(zhuǎn)熒光濾色轉(zhuǎn)盤;電腦顯示器中觀察。熒光光路shutter要后打開,先關(guān)閉,這樣可以保護(hù)樣本,避免過(guò)度的熒光猝滅。
4、無(wú)論怎么調(diào)整細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,鏡下的圖像都不清楚?
這種情況下很可能是鏡頭不干凈,可以用酒精棉擦拭一下鏡面。另外高倍數(shù)的物鏡鏡頭外也有一個(gè)旋鈕,適當(dāng)旋轉(zhuǎn)這個(gè)旋鈕也會(huì)使畫面變得清晰。
5、正確觀察白光的步驟?
將標(biāo)本置于載物臺(tái)上,打開電源開關(guān);將轉(zhuǎn)盤聚光器調(diào)整到明視場(chǎng),然后將環(huán)狀光闌調(diào)整到大光圈;從低倍鏡開始觀察。
好了,以上便是關(guān)于熒光顯微鏡的相關(guān)內(nèi)容介紹了。