顯微鏡資訊:克服高分辨率顯微鏡失焦的障礙!
但是,超高分辨率顯微鏡也會遇到失焦的障礙嗎?當(dāng)我們通過對位于反射光中心的一個點(或分子)顯微觀察時,會發(fā)生衍射。體視顯微鏡一臺儀器。指從不同角度觀察物體,使雙眼引起立體感覺的雙目顯微鏡。偏光顯微鏡用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種顯微鏡。這種顯微鏡的載物臺是可以旋轉(zhuǎn)的,當(dāng)載物臺上放入單折射的物質(zhì)時,無論如何旋轉(zhuǎn)載物臺,由于兩個偏振片是垂直的,顯微鏡里看不到光線,而放入雙折射性物質(zhì)時,由于光線通過這類物質(zhì)時發(fā)生偏轉(zhuǎn),因此旋轉(zhuǎn)載物臺便能檢測到這種物體。熒光顯微鏡以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發(fā)出熒光, 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。但是當(dāng)我們想要觀察物體時,會出現(xiàn)兩個以上的反射光點,這時兩個以上的光點會重疊現(xiàn)象,因此我們無法找到被觀察物體的真實位置。也就是說,研究人員必須有辦法在任何時候打開和關(guān)閉來自每個觀察分子的光。要做到這一點,研究人員必須通過基因工程將這些細(xì)胞改造成熒光蛋白質(zhì)體,原則上兩束激光只能制造出幾個研究人員想要同時觀察發(fā)光的分子,因此,這些熒光細(xì)胞成為顯微鏡觀察的焦點。當(dāng)研究人員用這種方法觀察細(xì)胞表面的一部分時,他們將不得不一遍又一遍地重復(fù)同樣的步驟,直到觀察到所有的表面組織。另一方面,如果細(xì)胞沒有經(jīng)過基因工程改造而發(fā)出熒光,科學(xué)家就無法研究細(xì)胞表面的分子結(jié)構(gòu),也無法在一瞬間掌握分子軌跡,而經(jīng)過基因改造的熒光分子可以持續(xù)不到一秒鐘。
現(xiàn)在,分子無線光學(xué)研究中心和神經(jīng)突觸細(xì)胞生理學(xué)實驗室(隸屬于美國國家科學(xué)院和波爾多大學(xué)研究實驗室)的生物學(xué)家發(fā)明了一種新技術(shù),可以讓細(xì)胞和分子“發(fā)光”。原理是使用immuno-marquage en temps reel。將被檢測的活細(xì)胞放入含有熒光抗體的溶液中(這種溶液市面上有售,使用的抗體要根據(jù)觀察對象而變化),使熒光抗體整合到細(xì)胞中。然而,研究人員不需要用這種抗體感染所有細(xì)胞,而是將熒光染料注入顯微鏡。在觀察過程中,部分抗體會自動與待觀察分子結(jié)合,使其發(fā)光。然后,當(dāng)這部分熒光消失后。
這項工程技術(shù)企業(yè)得以讓研究工作人員紀(jì)錄數(shù)以千計的單一細(xì)胞分子之運動發(fā)展軌跡,并且學(xué)生可以奈米層級觀察中國這樣的動態(tài)現(xiàn)象,國家社會科學(xué)理論研究數(shù)據(jù)中心與波爾多大學(xué)的研究員也向世人展示了這項信息技術(shù)方面具有一定高度重視效率問題以及可在各種方式不同的細(xì)胞免疫系統(tǒng)(異質(zhì)細(xì)胞、突狀纖維細(xì)胞或我們對于一般所說的神經(jīng)細(xì)胞)內(nèi)觀察內(nèi)膜組織中的各種分子。這項技術(shù)教學(xué)不僅需要使用一些簡單、用途廣、并且也是十分可靠,從今以后一般大眾就算自己沒有文化傳統(tǒng)的光學(xué)顯微設(shè)備也可以有效細(xì)部的細(xì)胞分子觀察。更特別的是,我們公司甚至也可以以每秒50奈米的解析度拍攝諸如神經(jīng)元等單一細(xì)胞的活動時間變化(相當(dāng)于一般攝影中每秒20個畫面)。波爾多大學(xué)的研究領(lǐng)域?qū)W者已經(jīng)逐漸開始以此觀察活體神經(jīng)突觸內(nèi)神經(jīng)接受器的動態(tài)經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)。