熒光顯微鏡是以紫外線為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。主要用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射也可發(fā)熒光。

熒光顯微鏡觀察到的熒光圖像具有形態(tài)特征，具有熒光顏色和亮度。在判斷結(jié)果時，要結(jié)合起來作出的判斷。結(jié)果是根據(jù)主觀指標(biāo)，即工人的眼睛來記錄的。隨著科技的發(fā)展，客觀指標(biāo)被用來記錄判斷結(jié)果，如使用細(xì)胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但是，這些所記錄的結(jié)果也要與主觀判斷相結(jié)合。

攝影對于記錄熒光圖像是非常必要的。由于熒光容易褪色和減弱，因此有必要對實時的結(jié)果進行記錄。該方法與普通顯微攝影方法基本相同。只需使用高速光敏膜，如ASA200或以上或24。上面。由于紫外光對熒光的猝滅效應(yīng)很大，如熒光標(biāo)記物FITC等，在紫外光照射30s時，熒光亮度下降了50%，因此曝光速度太慢，無法捕捉到熒光圖像，一般有半自動或全自動顯微攝影系統(tǒng)。

下面要為大家介紹的是熒光顯微鏡的使用注意事項：

①嚴(yán)格按照操作說明書的要求使用熒光顯微鏡，不改變該程序。

②觀察應(yīng)在暗室進行。進入暗室后，接通電源，點燃超高壓汞燈5-15分鐘。當(dāng)光源發(fā)出強光并穩(wěn)定下來時，眼睛有效適應(yīng)暗室，然后開始觀察標(biāo)本。

③為防止紫外線對眼睛造成損害，調(diào)節(jié)光源時戴防護眼鏡。

④每次檢查時間為1～2h，超過90min，超高壓汞燈的發(fā)光強度逐漸降低，熒光降低；紫外線照射3～5分鐘后熒光降低。因此，不超過2~3h。

希望上述介紹的內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解熒光顯微鏡。下期分享內(nèi)容再見！