國產(chǎn)熒光顯微鏡是生物醫(yī)學(xué)研究的重要工具,幾乎所有的有機(jī)分子都能夠直接或經(jīng)適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)處理后發(fā)出熒光而被觀察分析。在有機(jī)化學(xué)方面主要使用橙色和黃綠色兩種熒光,而在無機(jī)化學(xué)方面,熒光的顏色很多。此外,還有一些物質(zhì),即使在紫外線照射停止之后,還可繼續(xù)發(fā)光,呈磷光現(xiàn)象,也可利用這一特性進(jìn)行觀察。
熒光色素染色法不僅可用于精細(xì)觀察一般的細(xì)胞組織,也可用于微生物診斷,根據(jù)免yi反應(yīng)作抗原的組織化學(xué)檢驗(yàn),以至活體觀察、細(xì)胞的生死鑒別等。近年來,熒光抗體法不僅已廣泛地用于組織化學(xué)、微生物學(xué)、病理學(xué)等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,在抗體的合成、濾過性病毒的增殖和有關(guān)荷爾蒙激素及癌等的組織抗原的研究方面取得不少成果,并已作為臨床診斷手段被推廣,因此要求國產(chǎn)熒光顯微鏡的操作要更加方便而準(zhǔn)確。
下面要為您介紹的是使用國產(chǎn)熒光顯微鏡時可采用的方法:
①采用反射激發(fā)時,先在光路中加入綠色激發(fā)濾光片組,把照明可變孔徑光闌與視場光闌完全打開,調(diào)節(jié)光源位置,使照明光束通過物鏡轉(zhuǎn)換器的螺孔中央并使光源成象于物平面上,此時物鏡螺孔應(yīng)是通孔(不裝物鏡)。檢查激發(fā)光束是否通過物鏡螺孔中央,可在螺孔端面上放置半透明紙觀察光源光斑是否居中,在某些顯微鏡中,光源是在垂直面內(nèi)調(diào)節(jié)其上下左右位置,而光源成象是通過集光鏡沿軸方向移動來達(dá)到的。
②采用透射激發(fā)時,可以使用蘭色光線根據(jù)普通明場照明法進(jìn)行照明系統(tǒng)的調(diào)節(jié),這包括光源調(diào)節(jié)及聚光鏡中心的調(diào)節(jié)。如果采用暗場聚光鏡,則還需要注意暗場聚光鏡的使用及調(diào)節(jié)方法,當(dāng)用蘭色光線調(diào)節(jié)好后,就可采用更換濾色片的方法,使標(biāo)本得到所需要的激發(fā)光線照射標(biāo)本,但要注意使遏止濾光片已在光路中,這樣可以保護(hù)觀察者眼睛免受紫外線損傷。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解熒光顯微鏡。咱們下期分享內(nèi)容再見!