倒置熒光顯微鏡現(xiàn)在使用起來需要我們了解一些專業(yè)知識和物理知識。一般來說我們不需要了解里面的成像原理，但對于倒置熒光顯微鏡主要部件的作用，當(dāng)問題出現(xiàn)的時(shí)候，我們自己也就能夠“啟動(dòng)”進(jìn)行調(diào)整。今天我們就來看看倒置熒光顯微鏡的使用包括哪些需要注意的細(xì)節(jié)，大家也可以關(guān)注下。

①正確觀察白光的步驟？

將標(biāo)本放在載物臺上，打開電源開關(guān)；將轉(zhuǎn)盤聚光器調(diào)整到亮視場，再將環(huán)形光圈調(diào)整到大光圈；從低功耗鏡像開始。

②相位差環(huán)中的字母BF/PHL/PH2到底是什么意思？

倒置熒光顯微鏡結(jié)合了熒光附件和相差顯微鏡的特點(diǎn)。那么相位差環(huán)中的這些字母分別代表：PHL(40.13)，PH1(200.45)，PH2(400.6)，BF代表白光。因此，如果我們觀察熒光，可以選擇前三個(gè)差異。所謂相位差可以理解為放大了透明結(jié)構(gòu)，因?yàn)榧?xì)胞本身的內(nèi)部結(jié)構(gòu)是透明的，所以我們想要觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的時(shí)候需要用到相位差。

③無論如何調(diào)整細(xì)焦距螺旋，倒置熒光顯微鏡下的圖像都不清晰。

在這種情況下，鏡頭可能不干凈，因此我們就可以用酒精棉擦拭鏡子。此外，大功率物鏡外還有一個(gè)旋鈕，適當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)這個(gè)旋鈕也會(huì)使畫面清晰。

④如何正確觀察熒光？

關(guān)閉室內(nèi)燈，打開白光電源和汞燈電源。一般需要提前10分鐘打開汞燈預(yù)熱；關(guān)閉熒光快門，用低倍鏡找到細(xì)胞位置；關(guān)閉透光按鈕，打開熒光光路快門，旋轉(zhuǎn)熒光濾色片轉(zhuǎn)盤；計(jì)算機(jī)監(jiān)視器中的觀察。

熒光光路快門應(yīng)在后面打開，然后先關(guān)閉，這樣可以保護(hù)樣品，避免過度的熒光猝滅。

⑤汞燈怎么保養(yǎng)？

汞燈在工作時(shí)會(huì)散發(fā)大量的熱量，所以需要保持室內(nèi)溫度不要太高，有一個(gè)良好的散熱環(huán)境。汞燈的工作壽命一般為200小時(shí)，但使用時(shí)間越短，觀察越快，汞燈的壽命越長。相反，工作時(shí)間越短，汞燈壽命降低的越快，所以開關(guān)的次數(shù)要盡可能減少。

⑥為什么在目鏡下觀察到的圖像只有一半？

出現(xiàn)這種情況的原因是CT回路的調(diào)整出現(xiàn)了問題。CT環(huán)位于目鏡下方，也叫同軸對準(zhǔn)目鏡，有CT/O/S三種參數(shù)設(shè)置，CT對應(yīng)瞄準(zhǔn)望遠(yuǎn)鏡的光路；o對應(yīng)光路中沒有物體；s對應(yīng)光路中的擋光板。那么以上情況就是CT環(huán)的螺旋位于CT和S參數(shù)之間。

⑦白光觀察下的物體為什么這么暗？

環(huán)形隔膜沒有向大孔徑開口。環(huán)形光闌位于光源和聚光器之間，使光線通過聚光器聚焦在標(biāo)本上；或者光強(qiáng)調(diào)節(jié)旋鈕關(guān)閉。