熒光顯微鏡通常需要在黑暗的環(huán)境下操作，才能對(duì)標(biāo)本的圖案進(jìn)行鑒別，該設(shè)備操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)快速，能夠很好的用于活體檢測(cè)，和微生物新城代謝的變化過程，使用熒光顯微鏡之前要詳細(xì)閱讀說明書，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后打開設(shè)備等待一定時(shí)間后再開始工作，這樣才能減少眼睛的傷害，下面是詳細(xì)介紹。

一、熒光顯微鏡的特點(diǎn)

1、它以紫外光或蘭紫單色光激發(fā)標(biāo)本的熒光。因紫外光是不可見光，故由標(biāo)本發(fā)出的熒光與背景反差很大。熒光顯微鏡通常是在黑暗的背景下觀察彩色圖象的，而普通顯微鏡是在亮的背景下觀察較暗的樣品的。熒光顯微鏡的對(duì)比度約為普通顯微鏡的一百倍，因此可觀察到用普通顯微鏡看不到的結(jié)構(gòu)和細(xì)節(jié)。

2、用肉眼或普通顯微鏡觀察經(jīng)熒光色素染色的樣品時(shí)，只可看到整個(gè)標(biāo)本僅以同一顏色著色。而用熒光顯微鏡觀察時(shí)，標(biāo)本會(huì)發(fā)出染色色素特有的熒光，呈現(xiàn)出標(biāo)本的彩色圖案，易于鑒別，可減輕眼睛的疲勞。

3、用熒光色素染色，方法簡(jiǎn)單，制作標(biāo)本容易，有利于快速工作。

4、用于染色的熒光色素只要很低的濃度就能發(fā)出明亮的熒光，一般對(duì)機(jī)體無毒，故有利于活體觀察，如研究功能器官的變化過程和細(xì)微結(jié)構(gòu)，某些代謝過程的變化等。

5、利用熒光還有助于分析物質(zhì)的化學(xué)成分。例如，組織中有些重要成分能與藥物起作用而發(fā)熒光，拒此可鑒定它們的存在或定位。

二、熒光顯微鏡使用注意事項(xiàng)

1、嚴(yán)格按照熒光顯微鏡說明書要求進(jìn)行操作，不要隨意改變程序。

2、熒光顯微鏡應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后，接上電源，點(diǎn)燃超高壓汞燈5～15min，待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后，眼睛完全適應(yīng)暗室，再開始觀察標(biāo)本。

3、防止紫外線對(duì)眼睛的損害，在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。

4、檢查時(shí)間每次以1～2h為宜，超過90min，超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降，熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3～5min后，熒光也明顯減弱;所以，更多不得超過2～3h。

5、熒光顯微鏡光源壽命有限，標(biāo)本應(yīng)集中檢查，以節(jié)省時(shí)間，保護(hù)光源。天熱時(shí)，應(yīng)加電扇散熱降溫，新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí)，須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。

6、標(biāo)本染色后立即觀察，因時(shí)間久了熒光會(huì)逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中保存，可延緩熒光減弱時(shí)間，防止封裱劑蒸發(fā)。

7、熒光亮度的判斷標(biāo)準(zhǔn)：一般分為四級(jí)，即“-”表示無或可見微弱熒光?！?”表示僅能見明確可見的熒光?！?+”表示可見有明亮的熒光?！?++”表示可見耀眼的熒光。